转PRL基因小鼠遗传性状分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第9期北京时间：

作者：任艳萍，谢亮亮，李海艳，石德顺，李湘萍

单位：1.广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁 530004； 2.遵义医学院基础医学院，遵义 563003

摘要：本研究以原核注射法生产的乳腺特异性表达PRL基因小鼠为模型，从外源基因遗传完整性、拷贝数和插入位点3方面对其进行遗传性状分析，为今后大型转基因动物的选育提供基础。采用基因组DNA PCR方法筛选发生外源基因片段部分缺失的小鼠，并进行Southern blot验证，以检测外源基因的遗传完整性；用绝对荧光定量PCR方法测定外源基因拷贝数，用Genome walking方法分析外源基因整合位点。结果显示，外源基因片段部分缺失率为1.91%；整合十几个拷贝外源基因的小鼠在便携UV灯下可见绿色荧光，整合2个拷贝的小鼠无绿色荧光；在NW_001073945.1序列的2 025~2 026 bp和NW_001030574.1序列的10 760 020~10 760 021 bp处插入的外源基因可正常表达。以上结果说明，外源PRL基因在原核注射法生产的转基因小鼠中可稳定遗传；在一定范围内，外源基因的表达量与拷贝数呈正相关；附近无其他基因的外源基因插入位点有利于外源基因的表达。

关键词：

基金资助：国家转基因重大专项(2014ZX08007-001)；国家自然科学基金（31560632）；广西自然科学基金项目（2014GXNSFAA118084）