大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第10期北京时间：

作者：梁宏伟，冯波，朱雯宇，王建舫，张涛，穆祥

单位：(1.北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室，北京 102206；2.中国农业大学动物医学院，北京 100193)

摘要：旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织，组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞，37 ℃、5% CO2 培养箱中传代培养，采用免疫磁珠法对其进行分离纯化，并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定，通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况。结果显示：倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形，汇合后呈铺路石样，单层贴壁生长，细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性，流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性（P=0.1，且P<0.5），且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好。成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31272144）