山羊CC类趋化因子受体（CCR2）基因的克隆及组织表达分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第11期北京时间：

作者：朱江江，林亚秋，王永，李倩，林森

单位：1. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室，成都 610041；2. 西南民族大学生命科学与技术学院，成都 610041)

摘要：本研究旨在克隆山羊CC类趋化因子受体基因（CCR2）的CDS区序列，并检测其在山羊不同组织中mRNA和蛋白表达水平，从而为CCR2基因在山羊脂代谢中的作用研究奠定基础。选取2～3周岁的健康简州大耳羊和藏山羊羯羊各4只，屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织，分别提取组织总RNA及总蛋白，利用RT-PCR法克隆山羊CCR2基因序列，进行生物信息学分析，并利用实时定量PCR法和Western blot分别检测CCR2基因mRNA和蛋白的表达水平。结果显示，克隆得到CCR2基因cDNA序列1 186 bp，包含CDS全长1 100 bp，5′ UTR 2 bp 和3′ UTR 74 bp，编码370个氨基酸残基。山羊CCR2氨基酸序列与牛、猪、小鼠、人的相似性分别为97.3%、91.9%、77.0%和69.2%。山羊CCR2基因与牛具有最近的亲缘关系，其次为猪、狗和小鼠，而与人的亲缘关系较远。组织表达结果显示，CCR2在两种山羊肾和心中均具有较高的表达水平，而在皮下脂肪和肌肉中的表达水平较低。这些结果表明，CCR2可能在山羊脂质代谢过程中具有重要的调控作用。

关键词：

基金资助：中央高校基本科研业务费专项资金项目 (2015NZYQN80)；四川省应用基础研究计划(2016JY0147)