靶向鸭肠炎病毒NP基因RNAi对DEV增殖的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第1期北京时间：

作者：郑敏，罗乐，熊朝丽，吴良涛，华敏，万润，程振涛，周碧君，杨琦，文明

单位：1.贵州大学动物科学学院，贵阳550025；2.贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室，贵阳550025; 3.遵义市动物卫生监督所，遵义 520300；4.遵义市兽药饲料监测站，遵义 520300

摘要：为探究核衣壳蛋白(NP)对鸭肠炎病毒(DEV)增殖的影响，笔者根据GenBank上DEV-NP基因序列，设计并构建pSilencer-DEV-NP，采用三种不同方式处理转染鸭胚成纤维(DEF)细胞后，应用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析pSilencer-DEV-NP对DEV增殖的影响，结果显示：经荧光显微镜法观察，pSilencer-DEV-NP-l~4在DEF细胞中均呈现绿色荧光；FQ-PCR法扩增并计算，pSilencer-DEV-NP-l~4对DEV增殖的沉默效率分别为81.10%、72.69%、77.35%和67.69%；采用三种方法处理，pSilencer-DEV-NP-1对DEF细胞中DEV的增殖均有沉默作用，但沉默效率不尽一致，其中先后转染后感染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果最好，在处理60 h时沉默效率高达69.20%；同时转染和感染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果次之，在处理48 h时沉默效率最好仅达63.79%；先感染后转染时pSilencer-DEV-NP-1的沉默效果较差，在处理60 h时沉默效率最高仅为52.58%。上述研究结果提示，核衣壳蛋白对鸭肠炎病毒增殖具有一定的影响，为阐明核衣壳蛋白在鸭肠炎病毒复制与增殖的作用机制奠定了理论基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金项目(31260607；31560703)；贵州省优秀青年科学人才培养计划项目(黔科合人字［2013］25号)；贵州省百层次创新型人才项目(黔科合人才［2016］4009号)；贵州省科技创新人才团队建设项目(黔科合人才团队［2015］4016号)；贵州大学研究生创新基金项目(研农2016022)