猪DFAT细胞成脂再分化过程中KLF2和PPARγ的表达

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第1期北京时间：

作者：高霞，李方正，郇延军，刘志敏，李秀，姜忠玲，牛德勋，宋学雄

单位：青岛农业大学动物科技学院，青岛 266109

摘要：旨在探讨猪去分化脂肪细胞（DFAT）再分化过程中Krüppel样因子2（KLF2）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的表达模式，为揭示猪DFAT细胞再分化机制奠定基础。采集猪成熟脂肪细胞，经“天花板”培养法获得DFAT细胞，用流式细胞仪检测表面抗原，形态学和油红O染色提取法检测成脂分化程度，Real-time PCR检测KLF2和PPARγ mRNA的表达。结果表明，猪成熟脂肪细胞接种第3天，可见明显的去分化迹象，即细胞形成犄角状突起，大脂滴分解成小脂滴并向细胞外排出脂滴，接种至第9天脂滴基本排出完毕，接种至第12天原代细胞长满底壁；间充质干细胞表面抗原CD29、CD44和CD105的阳性表达率分别达到99.0%、97.8%和99.5%，而造血干细胞表面抗原CD45和CD34的表达仅为3.55%和4.55%；将F3代细胞成脂诱导3 d，胞质中出现脂滴，并随诱导时间增加，脂滴数量增多，体积增大，诱导至12 d诱导率达80%以上；成脂诱导2、5、10和15 d时，KLF2 mRNA的相对表达量分别为0.47±0.02、0.35±0.07、0.31±0.09和0.11±0.07，PPARγ mRNA的相对表达量分别为1.62±0.01、2.03±0.04、3.22±0.04和3.49±0.06。本研究成功获得高纯度的DFAT细胞，具有间充质干细胞特性和成脂再分化能力；KLF2 mRNA的表达在成脂分化过程中随诱导时间的增加而减少，而PPARγ mRNA的表达量随诱导时间的延长逐步增加；表明KLF2在DFAT细胞的成脂再分化过程中可能发挥抑制作用，而PPARγ可能会发挥促进作用。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金项目（31372392）