酵母表达的长角血蜱谷氨酰胺转移酶及其活性分析

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：胡燕红，余玲莹，黄晓红

单位：(福建师范大学生命科学学院 福建省发育与神经生物学重点实验室，福州 350117)

摘要：谷氨酰胺转移酶（TGase）通过催化蛋白质的谷氨酰胺残基与赖氨酸残基之间形成ε-(γ-谷氨酰基)赖氨酸异肽键，或在与肽结合的谷氨酰胺残基处掺入伯胺，促进蛋白质分子内和分子间的交联，形成网状的高分子聚合物，参与多种重要的生物学活动。本研究旨在克隆和表达长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）的谷氨酰胺转移酶基因（HlTGase，GenBank登录号为KX59300），并分析重组蛋白质的活性，评估其可能的应用价值。首先从长角血蜱上海株的成虫提取总RNA，根据表达序列标签的序列信息，设计引物扩增并克隆HlTGase基因，以质粒pPICZC为表达载体，将该基因在毕赤酵母中重组表达，进而对其编码蛋白质的分子特征及可能的应用价值进行评估。结果显示HlTGase基因的开放阅读框为2 262 bp，编码了一条756 aa的多肽链，该多肽链具有四个谷氨酰胺转移酶结构域，理论相对分子质量为84.6 ku；系统发育树显示其与果蝇的谷氨酰转移酶亲缘关系最近；在毕赤酵母中成功表达的重组蛋白质具有谷氨酰胺转移酶的活性，能催化酪蛋白交联成较大的分子。本研究成功地用酵母表达了长角血蜱谷氨酰胺转移酶，重组蛋白质有催化蛋白质交联的活性，具有一定的应用前景。

关键词：

基金资助：福建省自然科学基金（2014J01120）；福建师范大学生命科学学院本科生拔尖人才培养项目