牦牛RGS1基因克隆及其在发情周期卵巢中的表达

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：胡嘉嘉，熊显荣,石仙，蔡雯祎，兰道亮，李键

单位：(1.西南民族大学 生命科学与技术学院，成都 610041；2.西南民族大学青藏高原研究院，成都 610041

摘要：本研究旨在阐明牦牛RGS1基因的表达特性及其在牦牛发情周期中卵巢组织的表达。通过采集不同发情周期的牦牛卵巢及肌肉、脾、心、肾、胃、小肠、小脑、肝和肺组织，以GenBank上已发布的黄牛RGS1基因序列设计引物，利用RT-PCR方法扩增克隆牦牛RGS1基因及检测其在牦牛各组织中的表达谱，并使用相关生物信息学软件分析RGS1基因的结构和功能。采用实时荧光定量PCR法检测RGS1基因在牦牛发情周期卵巢中mRNA的表达水平。结果表明，本试验克隆得到牦牛RGS1基因718 bp的cDNA序列。同源性与进化树分析表明，牦牛RGS1核苷酸序列与黄牛、野牦牛等大多数哺乳动物的遗传距离较近，其在进化进程中相对较保守。牦牛RGS1基因CDS区为591 bp，编码196个氨基酸残基，相对分子质量为22.48 ku，不含跨膜结构和信号肽，为亲水性蛋白和非分泌蛋白。蛋白二级结构和三级结构以α-螺旋和自由卷曲结构为主。RGS1基因在所选牦牛组织样品中均有表达，其中在小肠、小脑、心和胃中表达量最高。荧光定量PCR结果显示，牦牛黄体期卵巢中RGS1 mRNA的表达量极显著高于卵泡期和红体期（P<0.01），卵泡期中RGS1 mRNA表达水平高于红体期，但差异不显著（P>0.05）。本研究成功克隆了RGS1基因及其在牦牛卵巢3个时期中mRNA的差异性，表明该基因参与发情周期卵巢的内分泌活动调控。

关键词：

基金资助：四川省科技支撑计划（2014NZ0114）；西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金（2016NZYQN38）