实时荧光LAMP法检测转基因猪的标记基因hCD39

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第3期北京时间：

作者：李津，刘巍，李俊超，金红岩，李刚

单位：(1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业部兽用药物与兽医生物技术科学观测实验站，北京100193; 2. 中国人民解放军总医院 心血管内科，北京 100853)

摘要：利用ESE-Quant tube scanner监测平台，建立了一种基于实时荧光LAMP技术的hCD39基因快速检测方法。针对hCD39基因设计6条特异性引物，在63 ℃条件下，进行核酸扩增反应45 min。在扩增前加入SYBR Green Ⅰ染料作为反应的指示剂，以SYBR Green Ⅰ染料的荧光强度作为结果判定标准。该方法灵敏度高，最小可检测到3 fg•μL－1；特异性好，与转基因猪中的标记基因hCD46、LEA29Y均无交叉反应；并且可对口腔拭子标本进行检测。因此，研究建立的实时荧光LAMP法，操作简单，反应快速，灵敏度高，特异性好，并且可以对猪活体进行无损伤采样检测，适合在现场快速简便的操作。

关键词：

基金资助：国家转基因重大专项（2014ZX0801203B-002）； 国家自然科学基金（31472203）；国家科技支撑计划(2013BAD12B05)；FAO/IAEA 国际合作项目（17453/D32025）