一株裂解性奶牛乳房炎源屎肠球菌噬菌体的分离及其生物学特性分析

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第4期北京时间：

作者：张倩, 于会举, 孙耀强, 张湘莉兰, 张培生, 刘鸽, 屈勇刚, 童贻刚, 李岩

单位：1. 石河子大学动物科技学院, 石河子 832003;2. 军事医学科学院微生物流行病研究所, 北京 100071;3. 新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站, 乌鲁木齐 830063

摘要：从新疆石河子地区奶牛粪样中分离裂解性屎肠球菌噬菌体，对其进行纯化及生物学特性分析，为治疗和控制细菌性感染提供基础。利用双层平板培养法从奶牛粪样中分离、纯化噬菌体，并观察噬菌斑特征，将纯化后的噬菌体浓缩液用磷钨酸负染，通过透射电子显微镜观察其形态特征。对该噬菌体进行全基因组测序和遗传进化分析，用双层平板培养法测定其宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性及pH稳定性。结果如下：分离并纯化出一株裂解性屎肠球菌噬菌体，命名为vB_EfaM_XJ3，其噬菌斑圆形透明、无晕环且边缘整齐，直径1.2~1.5 mm；电镜观察其头部呈廿面体，头长约53.15 nm，尾长约14.42 nm×199.62 nm；核酸类型为dsDNA，基因组全长为157.189 kb，GC含量为50.27%；其基因序列与沙门菌噬菌体SKML-39的相似性高达98%。生物学特性研究显示vB_EfaM_XJ3目前只裂解其宿主菌；最佳感染复数为0.001，潜伏期为15 min，爆发期为175 min，裂解量约为84；能耐受50℃左右高温，在pH 5.0~11.0范围内效价稳定。分离鉴定出一株裂解性肌尾科屎肠球菌噬菌体，对它进行了生物学特性和亲缘性分析，为沙门菌和屎肠球菌抑菌剂的研究与应用奠定了基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31560699）；新疆生产建设兵团应用基础研究计划项目（2015AG012）