小鼠精子透明质酸酶SPAM1在受精过程中的功能研究

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第4期北京时间：

作者：周崇, 黄莉, 石德顺, 蒋建荣, 马场忠

单位：1. 广西大学, 亚热带生物资源保护利用国家重点实验室, 南宁 530004;2. 广西壮族自治区兽医研究所, 广西兽医生物技术重点实验室, 南宁 530001;3. 日本筑波大学, 生命环境系, 筑波 305-8572

摘要：旨在研究小鼠精子透明质酸酶SPAM1（Sperm adhesion molecule 1）对受精过程中精子/卵丘互作的影响，并初步探讨其可能的作用机制。本研究抽提小鼠尾尖基因组，利用PCR法检测小鼠Spam基因型；筛选的野生型（WT）和Spam1敲除（KO）小鼠，提取附睾尾部精子蛋白进行Western blot和酶活性检测；经TYH培养液2 h获能后，分别对精子的运动性、穿透和分散卵丘细胞能力及体外受精（IVF）进行统计分析。结果表明，KO小鼠精子中未检测到SPAM1蛋白，透明质酸酶活性也极显著低于WT小鼠（P<0.01）；而获能后精子运动性，在KO和WT小鼠之间差异不显著（P>0.05）；与WT相比，KO小鼠精子缺失Spam1后，极显著地影响卵丘细胞层基质中精子顶体反应的发生比率（P<0.01），导致精子穿透卵丘细胞层的能力极显著降低（P<0.01），仅有少数精子能够到达卵子透明带表面，大量精子极易黏附于卵丘细胞层表面或外部边缘（P<0.01）；此外，KO小鼠精子IVF 2 h的卵丘细胞分散和受精率均呈现显著延迟（P<0.05）。综上表明，小鼠精子透明质酸酶SPAM1与顶体反应相关联并影响精子/卵丘互作。揭示SPAM1在穿卵过程中除了具有降解透明质酸的作用外，还存在其他的非酶活性功能。

关键词：

基金资助：广西自然科学基金（2014GXNSFCA118008）