检测猪流行性腹泻病毒S1蛋白抗体的间接ELISA方法

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第6期北京时间：

作者：姚作俊, 郝达仁, 白云, 颜国华, 王海敏, 宋勤叶, 李潭清

单位：1. 河北农业大学动物医学院 河北省兽用生物制品工程技术研究中心, 保定 071000;2. 河北省畜牧兽医研究所, 保定 071000

摘要：为了建立检测猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）抗体的间接ELISA方法，初步分析PED灭活疫苗免疫母猪所产仔猪的血清母源特异抗体动态，笔者应用重组PEDV部分纤突（spike，S）蛋白作为检测抗原，建立了基于PEDV S1蛋白的间接ELISA抗体检测方法，并用该方法检测了产前4周用PED灭活疫苗免疫母猪的初乳、分娩当天血清及其仔猪1、7、14、21、28和35日龄（d）时血清中的PEDV抗体。结果显示：建立的间接ELISA方法能够特异地检测PEDV抗体，与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪轮状病毒的抗血清无交叉反应；敏感性高于免疫过氧化物酶单层试验（immunoperoxidase monolayer assay，IPMA），与IPMA检测结果的符合率为97.14%；批内和批间重复性试验的变异系数小于10%。免疫母猪初乳、分娩当天血清中的PEDV抗体阳性率为100%，初乳比血清中的平均抗体水平低；1 d仔猪血清PEDV抗体阳性率为50%，平均抗体水平低，与初乳中的抗体水平接近，7 d以后所有仔猪血清全部转为PEDV抗体阴性。建立了检测PEDV抗体的间接ELISA方法；产前用PEDV灭活疫苗给怀孕母猪免疫1次时，其所产仔猪血清中的母源特异抗体阳性率和抗体水平低，且维持时间短暂。

关键词：

基金资助：国家重点研发计划（2016YFD0500703）；国家自然科学基金（31372441）