RNA干扰INHα基因对绵羊颗粒细胞周期及凋亡相关基因表达的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第8期北京时间：

作者：李婷, 马爱团, 张英杰, 刘月琴, 段春辉

单位：河北农业大学动物科技学院, 保定 071000

摘要：旨在研究RNA干扰INHα基因对绵羊颗粒细胞周期及凋亡相关基因表达的影响，明确抑制素对绵羊颗粒细胞的局部调节作用，为今后提高动物的繁殖力奠定基础。选用1.0~1.5岁的小尾寒羊，从卵泡（3~7 mm）中分离培养颗粒细胞，将siINHα和siNC（阴性对照）转染颗粒细胞，以未转染的细胞为空白对照（Control），利用脂质体介导法进行转染，荧光定量RT-PCR检测INHα基因的沉默效率、细胞周期和凋亡相关基因的变化，流式细胞仪检测细胞周期的分布变化。结果表明，siRNA转染绵羊颗粒细胞48 h后，INHα基因的沉默效率达85%以上。与阴性对照相比，细胞周期相关基因Cyclin D1和Cyclin B1 mRNA的表达水平分别降低了0.2倍和0.7倍（P<0.05），而p21的mRNA表达水平升高了0.9倍（P<0.05）；细胞凋亡通路中的促凋亡因子Bax、p53和Caspase3的mRNA表达量分别升高了1.8倍、3.6倍和0.4倍（P<0.05），而抗凋亡因子Bcl-2 mRNA表达量不受影响，阴性对照与空白对照差异不显著（P>0.05）。与阴性对照相比，细胞周期的分布显著改变，干扰组G1细胞比例显著升高（P<0.05），S期细胞比例显著降低（P<0.05），而阴性对照与空白对照间无显著差异（P>0.05）。综上表明，INHα作为绵羊颗粒细胞中关键的调控因子，通过调控绵羊颗粒细胞的生长和凋亡参与调控绵羊卵泡排卵的过程。

关键词：

基金资助：国家现代肉羊产业技术体系项目（CARS-39）；河北省研究生创新资助项目（1099009）