猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第9期北京时间：

作者：陈新瑶, 张建龙, 董星, 陈景杰, 黄一帆, 李健

单位：1. 福建农林大学 福建省兽医中药与动物保健重点实验室, 福州 350002;2. 中西兽医结合与动物保健福建省高等学校重点实验室, 福州 350002

摘要：旨在探究在H2O2诱导的氧化应激损伤状态下，猴头菇多糖（HEPs）对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组：空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H2O2和HEPs的最佳剂量；利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇（ROS）的含量；通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛（MDA）的含量，细胞中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活力以及乳酸脱氢酶（LDH）的释放率；应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平。结果显示，（1）构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H2O2浓度为0.4 mmol·L-1。（2） H2O2能够极显著地增加细胞内的ROS含量，诱导细胞凋亡，同时极显著地降低了SOD和CAT的活力，极显著地升高MDA含量与LDH释放率。但是，与模型组相比，经过HEPs预处理后，细胞内ROS的含量极显著地降低（P<0.01）；同时极显著地提高了SOD和CAT的活力（P<0.01），极显著地降低了MDA含量与LDH释放率（P<0.01）。（3）实时荧光定量PCR结果显示，H2O2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量（P<0.01），与模型组比较，HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量（P<0.01）；Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似。可见，猴头菇多糖对H2O2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31502110）