噬菌体Bp7穿孔素holin的克隆、表达及其活性分析

来源：畜牧兽医学报杂志2017年第12期北京时间：

作者：齐心, 陈培培, 邹玲, 刘文华, 任慧英, 张灿

单位：青岛农业大学动物医学院, 青岛 266109

摘要：为了研究噬菌体Bp7穿孔素holin的特征及其对细菌的抑制作用，根据噬菌体Bp7的基因序列，设计引物PCR扩增穿孔素holin基因，并对其序列进行比对和分析。构建holin原核重组表达质粒pCold-holin，在大肠杆菌BL21中诱导表达，摸索最佳表达条件。亲和层析法纯化蛋白质，并对其抑菌活性进行测定。结果表明，噬菌体Bp7的holin蛋白含有一个跨膜区，属于Phage-holin-T家族；在E.coli BL21表达的重组holin蛋白以可溶性形式存在。表达菌E.coli BL21浊度测定试验结果表明holin蛋白的表达在4 h内能够显著抑制表达菌E.coli BL21的增殖，活菌数减少，菌体出现凝集现象。研究结果提示噬菌体Bp7的holin蛋白具有抑菌活性，这将为进一步研究穿孔素的抑菌机制奠定基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31600149）；山东省自然科学基金（ZR2015CM020）