缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子对肉鸡心肌脂肪酸代谢的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第1期北京时间：

作者：任昊, 李丽芳, 王彦美, 黄楠, 裴芳樱, 李嘉威, 孙耀贵, 段智变, 李宏全, 王文魁

单位：1. 山西农业大学动物科技学院, 太谷 030801;2. 山西农业大学信息学院环境科学与食品工程系, 太谷 030801;3. 滨州学院生物工程学院, 滨州 256600

摘要：旨在探讨缺氧条件下巨噬细胞移动抑制因子（MIF）对肉鸡心肌脂肪酸代谢的影响。取9~12日龄鸡胚，采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化法分离培养心肌细胞，镜下观察细胞形态及活力，并对其进行免疫细胞化学鉴定。以低氧诱导因子1α（HIF-1α）为缺氧指标，化学缺氧模拟剂氯化钴（CoCl2）处理鸡胚心肌细胞，构建细胞缺氧模型。为了确认MIF与磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）的关系，在缺氧模型上用MIF抑制剂（ISO-1）阻断MIF，观测p-AMPK是否随MIF阻断而变化。利用Western bolt检测脂肪酸代谢关键酶脂肪酸转运酶（FAT/CD36）、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶（p-ACC）及肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT-1A）是否在缺氧状态下发生变化。结果：经差速培养的鸡心肌细胞纯度达90%以上；镜下观察，细胞呈梭形和不规则形，并可自发节律性搏动，频率80~130次·min-1。Western bolt检测显示，经600 μmol·L-1 CoCl2处理心肌细胞24 h，HIF-1α表达较正常对照组极显著升高（P<0.01）；100 μmol·L-1 ISO-1阻断MIF后，MIF及p-AMPK表达量均明显降低（P<0.01）。与正常组相比，缺氧组心肌MIF、p-AMPK、FAT/CD36、p-ACC和CPT-1A表达均极显著升高（P<0.01）；ISO阻断组心肌各目的蛋白质的表达较缺氧组均极显著下降（P<0.01）。缺氧条件下，心肌自分泌MIF增多，通过激活AMPK促进脂肪酸相继进入细胞质和线粒体，加强氧化供能，为缺氧提供代偿性保护。

关键词：

基金资助：山西省科技厅自然基金（2014011028-2）