抗病毒蛋白Viperin抑制猪瘟病毒在PK-15细胞上的复制

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第1期北京时间：

作者：李文良, 毛立, 邓加武, 郝飞, 李基棕, 杨蕾蕾, 张纹纹, 江杰元

单位：江苏省农业科学院兽医研究所, 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室, 南京 210014

摘要：Viperin是一种抗病毒蛋白，具有广谱的抗病毒功能。为了研究猪源抗病毒蛋白Viperin对猪瘟病毒（CSFV）的抗病毒作用及机制，通过构建细胞系过表达或通过siRNA转染抑制Viperin表达，采用荧光定量RT-PCR和病毒滴度测定检测CSFV增殖水平的变化；检测培养上清和细胞中病毒含量的变化趋势，评价其对病毒释放的影响；进而通过共聚焦试验和免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）试验检测Viperin与病毒E2蛋白的共定位与相互作用。与对照细胞相比，过表达Viperin蛋白可以显著抑制CSFV在PK-15细胞上的复制，在感染后24、48、72 h，病毒基因水平和病毒滴度分别下降68.75%、83.61%、77.27%和68.75%、87.5%、80.39%。通过RNA干扰技术抑制Viperin在PK-Vi细胞中的表达后CSFV复制显著恢复（仍低于对照组）。培养上清和细胞中病毒含量均同等程度受到抑制，表明Viperin表达对病毒的释放没有影响。共聚焦试验证明Viperin蛋白与E2蛋白在细胞内存在共定位现象。免疫共沉淀试验证明Viperin蛋白与E2蛋白存在相互作用。该研究证实Viperin具有抗CSFV作用，该作用可能是通过与病毒E2蛋白相互作用实现的，这为CSFV与宿主免疫反应相互作用研究提供了理论基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31402180）；江苏省自然科学基金（BK20130729）