干扰MSTN对绵羊成肌细胞增殖分化及相关基因表达的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第1期北京时间：

作者：王红娜, 孙洪新, 张英杰, 刘月琴, 谷振慧, 史秀芬

单位：1. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071000;2. 河北省畜牧兽医研究所, 保定 071000

摘要：旨在探讨MSTN基因对绵羊成肌细胞增殖和分化的作用及相关机制，进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的生物学功能。本研究利用重组腺病毒介导shRNA干扰绵羊成肌细胞内源性MSTN基因表达，通过CCK-8法检测成肌细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期变化，qRT-PCR检测p21基因表达。成肌细胞诱导分化后利用免疫细胞化学技术检测肌管的形成情况，统计细胞融合率，qRT-PCR检测诱导48、72、96 h后 MyoD、MyoG、Myf5、Myf6和HACD1基因的表达量变化。结果发现，干扰MSTN后成肌细胞的增殖受到抑制，细胞周期停滞在G0/G1期，并且p21的表达呈上升趋势。在对成肌细胞分化作用的研究中，发现干扰组与阴性对照组相比，诱导48 h 4个生肌调节因子的表达量均呈下降趋势，MyoG基因表达显著下调（P<0.05）；诱导72 h干扰组成肌细胞融合率极显著高于阴性对照组（P<0.01），Myf5和Myf6基因表达量极显著降低（P<0.01），MyoD基因表达量升高不显著（P>0.05），MyoG基因表达量极显著增加（P<0.01），诱导96 h，Myf5基因表达量显著降低（P<0.05），MyoD基因表达量降低不显著（P>0.05），MyoG基因表达量极显著降低（P<0.01），Myf6基因表达量升高不显著（P>0.05）。另外诱导72 h，HACD1基因的表达量在干扰组中显著高于阴性对照组（P<0.05），诱导48和96 h无显著变化。研究表明，干扰MSTN表达对成肌细胞的增殖有抑制作用，对分化有促进作用，HACD1基因与成肌细胞融合相关。

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基金资助：国家肉羊产业技术体系资助项目（CARS-39）