猪链球菌通用型和2型双重荧光定量PCR快速检测技术的建立和应用

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第2期北京时间：

作者：吴静波, 南文金, 黄健强, 胡鸿惠, 彭国良, 彭凌, 董小英

单位：韶关学院粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心, 韶关 512005

摘要：为快速区分检测猪链球菌血清型2型和其他血清型，以猪链球菌的保守基因gdh和2型特异性基因cps2J为靶基因设计引物和TaqMan探针，建立猪链球菌通用型和2型特异性的双重荧光定量PCR检测方法，并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示：本方法在1.5 h内可完成猪链球菌和2型猪链球菌同时检测，与其他细菌无交叉反应；检测灵敏度可达5拷贝数，标准曲线相关系数大于0.999，批内和批间CV均小于1.25%。对67份临床样品检测显示猪链球菌和2型猪链球菌检出率分别为79.1%和35.8%，与常规PCR检测结果的符合率为92.5%和89.6%，kappa值为0.800和0.757，具有极好的一致性。成功建立了灵敏、特异和稳定的双重荧光定量PCR方法，实现了猪链球菌和2型猪链球菌同时及快速诊断。

关键词：

基金资助：广东省粤北生猪生产与疫病防控协同创新发展中心项目；广东省现代农业产业技术体系建设专项（生猪创新团队）；韶关市科技计划项目（韶科[2016]44号）；韶关学院科研项目（314-140694）；广东省科技计划项目（2017A020225044）