捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第3期北京时间：

作者：周丽娜, 胡孟娟, 孙伟, 李祥瑞, 徐立新, 宋小凯, 严若峰

单位：南京农业大学动物医学院, 南京 210095

摘要：选取捻转血矛线虫脂肪酶（Lipase）进行基因克隆、表达并对其生物学特性进行探究。PCR克隆捻转血矛线虫lipase基因，构建表达载体，获得融合蛋白质，采用Western blot检测该蛋白质的抗原特性；酯类酶解反应检测该融合蛋白质脂肪酶活性；实时定量PCR检测该基因在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录情况；间接免疫荧光试验检验该抗原蛋白质在虫体组织的定位情况。结果表明，去除lipase基因信号肽序列后，基因片段长864 bp，融合蛋白质大小50 ku；该融合蛋白质在37℃左右、pH为7的条件下酶活力最高；雄性成虫lipase转录量相对虫体其他阶段最高；该抗原蛋白质主要表达于虫体表皮和肠腔。Lipase具有较好的抗原性，可能与捻转血矛线虫发育和宿主免疫调节有关，深入研究捻转血矛线虫Lipase的特性对寻找新的免疫保护性抗原和药物靶标具有意义。

关键词：

基金资助：中央高校基本科研业务费（KYYJ201710）；国家重点基础发展研究计划（973计划）（2015CB150300）；江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）