2012—2016年中国南方地区帕利亚姆血清群病毒的分离与序列特征分析

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第4期北京时间：

作者：杨恒, 肖雷, 李占鸿, 孟锦昕, 杨振兴, 吕敏娜, 林栩慧, 廖德芳, 牛保生, 李华春

单位：1. 云南省畜牧兽医科学院 热带亚热带动物病毒重点实验室, 昆明 650224;2. 广东省农业科学院动物卫生研究所, 广州 510640;3. 云南省师宗县动物疫病预防控制中心, 师宗 655799

摘要：旨在从牛、羊监控动物群中，对流行于我国的帕利亚姆血清群病毒（PALV）进行分离、鉴定与序列特征分析，明确我国流行毒株与国外毒株之间的关系。自监控动物采集的PALV阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离；对所分离PALV毒株的Seg-7与Seg-2基因节段进行扩增、测序与序列分析；通过高分辨率琼脂糖凝胶电泳分析不同血清型PALV代表毒株基因组的“电泳带型”特征；通过免疫荧光与中和试验分析不同血清型PALV的阳性血清之间的交叉反应特性与中和活性。试验结果如下：2012—2016年，在云南、广西、广东共计分离出19株PALV；Seg-2与Seg-7测序与系统发育分析显示，分离毒株分属Chuzan virus（CHUV）、D’Aguilar virus（DAV）与Bunyip Creek virus（BCV）三种血清型，不同血清型毒株均与日本毒株具有最近的亲缘关系，而与澳洲、非洲毒株亲缘关系较远。病毒基因组电泳结果显示PALV基因组呈现“3-3-4”的电泳带型特征。免疫荧光结果显示针对CHUV的多克隆抗体可使感染CHUV、DAV与BCV的BHK-21细胞呈现特异性荧光。血清学中和试验显示，CHUV、DAV与BCV三种病毒的阳性血清之间无交叉中和保护作用。本研究报道了2012—2016年中国PALV的分离与Seg-2、Seg-7序列特征，并首次报道了PALV的DAV与BCV两种血清型病毒在我国的分离，研究结果将有助于掌握我国PALV的分布与遗传特征，为诊断试剂的开发、流行病学调查与致病性研究提供科学依据。

关键词：

基金资助：国家重点研发计划（2016YFD0500908）；公益性行业（农业）科研专项（201303035）；国家自然科学基金（31360621；31760744）