TGF-β调节仔猪睾丸支持细胞增殖的机制

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第4期北京时间：

作者：黄莎, 孙思, 邓洁, 胡煜, 练雨, 王鲜忠

单位：西南大学动物科技学院 重庆市牧草与草食家畜重点实验室, 重庆 400716

摘要：旨在研究TGF-β对仔猪睾丸支持细胞增殖相关蛋白及基因表达的影响，进一步揭示TGF-β调控仔猪支持细胞增殖的作用机制。本研究用TGF-β及TGF-β/Smad通路抑制剂LY2109761处理培养的仔猪睾丸支持细胞，通过CCK-8与流式细胞术检测支持细胞活性和细胞周期，Western blotting检测Smad3的蛋白磷酸化水平，实时定量PCR（RT-qPCR）检测c-Myc mRNA、Skp2 mRNA及ssc-miRNA-24的表达。此外，支持细胞转染ssc-miRNA-24模拟物、抑制剂后，用TGF-β处理支持细胞，检测相关基因和蛋白的表达。结果表明，TGF-β以剂量依赖方式影响支持细胞活性；180 pg·mL-1 TGF-β以时间（0~24 h）依赖方式影响细胞增殖指数（Proliferation index，PI）和S期细胞比例（S-phase cell fraction，SPF），抑制Smad3磷酸化，增加c-Myc mRNA、Skp2 mRNA、ssc-miRNA-24的表达；10 μmol·L-1 LY2109761促进TGF-β诱导支持细胞活性，并增加细胞增殖指数和S期细胞比例。ssc-miRNA-24模拟物抑制Smad3磷酸化，促进c-Myc、Skp2 mRNA表达；ssc-miRNA-24抑制剂则具有相反的效果。综上表明，在仔猪睾丸支持细胞中，TGF-β可通过增加ssc-miRNA-24的表达，抑制Smad3磷酸化，增强c-Myc与Skp2 mRNA的表达，促进支持细胞增殖。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金项目（31672624；31072183）；中央高校基本科研业务费专项资金（XDJK2017D029）