转录因子PAX4调控湖羊FSHR基因转录活性

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第5期北京时间：

作者：王德迪, 李隐侠, 姚一龙, 潘增祥, 决肯, 依明, 曹少先, 李齐发

单位：1. 南京农业大学动物科技学院, 南京 210095;2. 江苏省农业科学院畜牧研究所, 南京 210014;3. 新疆农业大学动物科学学院, 乌鲁木齐 830052

摘要：本研究旨在了解湖羊FSHR基因5'-UTR序列特征和转录因子调控，为揭示湖羊FSHR基因转录调控机制提供依据。采集3只成年湖羊母羊的心、肝、脾、肺、肾、胃、肌肉、大肠、小肠、子宫和卵巢11种组织，采用PCR扩增和克隆测序技术获得湖羊FSHR基因5'-UTR序列，生物信息学方法分析其序列特征，RT-PCR技术分析转录因子PAX4在湖羊11种组织中的表达情况；合成湖羊PAX4基因过表达载体pcDNA3.1-PAX4，并将其转染到猪卵巢颗粒细胞（GCs），用流式细胞仪测定了GCs的细胞凋亡率。双荧光素酶报告基因系统检测PAX4对湖羊FSHR基因转录活性的影响。结果表明，湖羊FSHR基因5'-UTR全长为161 bp，含有典型的E-box、CAAT-box和GC-box等转录调控元件以及GATA-2、Sp1和PAX4等转录因子结合位点。转录因子PAX4在湖羊各组织中均有表达，其中在卵巢组织中等表达。湖羊PAX4过表达载体可在卵巢颗粒细胞高效表达（P<0.01）。过表达湖羊PAX4基因后，卵巢颗粒细胞凋亡率显著上升（P<0.05），卵巢颗粒细胞和COS-7细胞中FSHR基因5'-UTR双荧光素酶报告载体的荧光素酶活性显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）下调。综上表明，转录因子PAX4抑制湖羊FSHR基因转录活性，从而促进卵巢颗粒细胞凋亡。

关键词：

基金资助：江苏省自然科学基金（BK20141369）；中央高校基本科研业务费专项资金（KYYJ201709）；江苏省农业科技自主创新资金项目（CX（15）1007）