针对不同形式猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5重组蛋白的抗体中和活性比较

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第6期北京时间：

作者：冯延, 郭嘉, 许瑞勤, 马思续, 魏凤灵, 张留君, 杨国宇, 夏平安, 张改平

单位：河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002

摘要：GP5蛋白被认为是猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导中和抗体的主要蛋白，为探讨GP5蛋白诱导免疫保护的能力，本研究用杆状病毒/昆虫表达系统分别表达了全长和截短的GP5蛋白，同时用大肠杆菌表达系统表达了截短的GP5蛋白。三种重组蛋白经纯化后，免疫小鼠制备抗血清，以PRRSV全病毒作为ELISA包被抗原检测抗血清时，原核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1∶200，真核表达的全长GP5蛋白抗血清效价为1∶800，真核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1∶1 600。将获得的三种抗血清分别在猪肺泡巨噬细胞（porcine alveolar macrophages，PAMs）进行PRRSV同源（PRRSV VR2332）和异源（PRRSV HeN-3）毒株的血清学中和试验，并通过实时定量PCR方法检测各组中PRRSV mRNA的绝对拷贝数，以抗血清的病毒阻断率≥70%的最大血清稀释度作为该血清的中和效价。结果显示：1）三种重组蛋白的抗血清对两种PRRSV毒株的中和效价均<1∶2，不具有中和活性，部分稀释滴度的血清还增强了病毒的感染；2）抗PRRSV全病毒对照阳性血清对同源毒株的中和效价为1∶8，具有中和活性；对异源毒株的中和效价<1∶2，不具有中和活性，同时还产生了ADE增强作用。上述研究结果提示，GP5的主要中和表位可能更多是构象表位，PRRSV全病毒中主要诱导中和抗体产生的蛋白可能并不完全在GP5蛋白上；PRRSV全病毒阳性抗血清虽然能够提供一定的免疫保护，但这种免疫保护只发生在同源毒株之间，对异源毒株并没有效果，反而会介导ADE效应发生。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金重大项目（31490600）；国家自然科学基金面上项目（31572520）