稳定表达SLAM受体的Vero和BHK21细胞系的建立及其对犬瘟热病毒分离效果的比较

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第6期北京时间：

作者：朱璐, 燕霞, 代科, 王正皓, 赵玉佳, 杨振, 文心田, 曹三杰, 黄小波, 伍锐, 赵勤, 文翼平

单位：1. 四川农业大学动物医学院猪病研究中心, 成都 611130;2. 成都大熊猫繁育研究基地, 成都 610081

摘要：旨在构建稳定表达SLAM受体的SLAM-Vero细胞系和SLAM-BHK21细胞系，并比较其对犬瘟热病毒（CDV）野毒株的敏感性，为CDV野毒株的快速分离与研究提供一种有效的工具。将真核表达载体Pcag-SLAM分别转染Vero细胞和BHK21细胞。经G418压力筛选结合有限稀释法筛选阳性克隆株，并通过RT-PCR、间接免疫荧光鉴定（IFA）和Western blot等方法对稳定表达SLAM受体的SLAM-Vero细胞系和SLAM-BHK21细胞系加以验证。应用这两种细胞系对3例临床犬瘟热病例的5种不同组织进行病毒分离，对分离得到的CDV进行RT-PCR及IFA鉴定。结果显示，经RT-PCR和Western blot验证，本研究成功构建出SLAM-Vero细胞系和SLAM-BHK21细胞系，SLAM-Vero细胞接种病毒12~24 h即可出现典型的CDV导致的细胞融合体CPE，利用SLAM-Vero细胞从3只CDV阳性犬的肺和脾中分离得到2株CDV，而SLAM-BHK21细胞、亲本Vero细胞及亲本BHK21细胞未能分离出病毒。研究表明，与SLAM-BHK21细胞相比，SLAM-Vero细胞对CDV的分离率较高，并能产生明显的CPE。在分离CDV野毒株时，选择肺和脾更容易在SLAM-Vero细胞系上分离出病毒。

关键词：

基金资助：成都大熊猫繁育研究基金会资助项目（CPF：2015-05）