不同毛色牦牛皮肤组织学观察及MC1R基因功能验证

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第7期北京时间：

作者：唐朋, 凌笑笑, 高泽成, 贾聪俊, 梁春年, 吴晓云, 褚敏, 阎萍

单位：1. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所, 甘肃省牦牛繁育重点实验室, 兰州 730050;2. 甘肃农业大学动物科技学院, 兰州 730050

摘要：旨在阐明不同毛色牦牛皮肤组织形态学特点及MC1R调控黑色素合成的可能分子机制。采集大通牦牛（黑褐色）和天祝白牦牛（白色）各6头的背部皮肤组织，用甲苯胺蓝染色法分别对不同毛色牦牛皮肤组织进行染色，观察黑色素和成熟黑色素细胞的含量差异及分布特征，并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测MC1R在不同毛色牦牛皮肤中的表达差异。B16小鼠黑色素瘤细胞中转染shRNA MC1R干扰载体后，应用qRT-PCR和Western blot检测转染效率，分析比较各组中与毛色相关基因（Agouti、MITF、TYR）的表达差异性，利用酶标仪检测不同时间点黑色素产量。结果表明，两种毛色牦牛的表皮和毛囊周围均分布着大量的黑色素细胞，但天祝白牦牛仅在表皮基底层和毛根处检测到少量黑色素，而大通牦牛表皮层和毛囊处产生大量黑色素。与大通牦牛相比，天祝白牦牛皮肤中MC1R表达量极显著降低（P<0.01）。在成功抑制MC1R的B16细胞中，TYR表达量极显著降低（P<0.01），MITF表达量显著降低（P<0.05），而Agouti表达量未发生显著变化（P>0.05）；同时黑色素含量减少。综上表明，黑色素大量沉积与MC1R高表达是导致牦牛毛色差异的原因。将shRNA MC1R载体成功转染B16小鼠黑色素瘤细胞后，MC1R的抑制情况与下游调控基因TYR表达一致，进而降低黑色素含量，说明MC1R对黑色素的合成及毛色形成起重要的调控作用。

关键词：

基金资助：现代肉牛牦牛产业技术体系（CARS-37）；中国农业科学院创新工程项目（CAAS-ASTIP-2014-LIHPS-01）