组蛋白甲基化抑制剂UNC0638对水牛转基因细胞外源基因表达的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第10期北京时间：

作者：刘晓华, 文冬梅, 余庆, 邓凯, 陆凤花, 石德顺

单位：广西大学, 亚热带资源保护与利用国家重点实验室, 南宁 530004

摘要：本研究旨在探讨不同浓度的组蛋白甲基化抑制剂UNC0638对转基因水牛成纤维细胞外源基因表达水平的影响，为外源基因表达机制研究及提高转基因水牛生产效率提供理论依据。试验首先使用不同浓度的UNC0638（0（对照组）、0.5、1.5、2.5、5.0 μmol·L-1）处理水牛胎儿成纤维细胞（BFFs）8 d，绘制细胞生长曲线，并在UNC0638（0（对照组）、0.5、1.5、2.5 μmol·L-1）处理BFFs 48 h后，检测细胞核型，同时利用细胞免疫荧光技术分析组蛋白H3K9me2甲基化水平，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测UNC0638对水牛转基因细胞外源基因表达效率的影响。结果表明：1）BFFs经不同浓度UNC0638处理后，生长曲线与对照组相似，均呈"S"形分布，0.5、1.5、2.5 μmol·L-1 UNC0638处理组与对照组相比细胞增殖效率没有发生显著变化，5.0 μmol·L-1 UNC0638抑制BFFs增殖；2）各处理组细胞核型正常率与对照组间差异不显著；3）此外，UNC0638处理组的细胞组蛋白H3K9me2甲基化水平显著低于对照组（P<0.05）；4）UNC0638（0、0.5、1.5、2.5 μmol·L-1）处理水牛转基因胎儿成纤维细胞24 h，2.5 μmol·L-1组细胞eGFP的相对表达量显著高于对照组（P<0.05）；处理48 h，0.5、1.5、2.5 μmol·L-1组eGFP的表达量与对照组相比显著提高（P<0.05）。综上表明，UNC0638可有效降低水牛成纤维细胞组蛋白H3K9me2甲基化水平并提高水牛转基因细胞外源基因的表达效率。

关键词：

基金资助：国家高技术研究发展计划"863"项目（2011AA100607）；国家自然科学基金项目（31560633；31760666；31460282）；广西创新驱动项目（桂科AA17204051）