酿酒酵母β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第11期北京时间：

作者：张曼, 金鑫, 王云鹤, 魏方, 温婧怡, 李政忆, 杨银凤

单位：1. 内蒙古农业大学兽医学院, 呼和浩特 010018;2. 农业部动物疾病临床诊疗技术重点试验室, 呼和浩特 010018

摘要：为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞（ruminal epithelial cells，RECs）β-防御素-1（sheep β-defensin-1，SBD-1）表达的影响。本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型，用不同浓度（0、5、10、20、50和100 μg·mL-1）的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后，利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化，选出诱导SBD-1表达最高的β-葡聚糖浓度。然后用β-葡聚糖的最佳刺激浓度对RECs分别刺激0、2、4、8、12和24 h，同样利用qPCR和ELISA方法对RECs SBD-1的表达变化进行检测，从而筛选出诱导SBD-1表达最高的刺激时间。qPCR和ELISA结果显示，β-葡聚糖（5～100 μg·mL-1）刺激RECs 8 h后，SBD-1 mRNA和蛋白的表达随着β-葡聚糖浓度的升高均呈现先升高后降低趋势，且当β-葡聚糖浓度为10 μg·mL-1时SBD-1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组（P<0.01）。当用10 μg·mL-1的β-葡聚糖刺激RECs 0～24 h后，qPCR结果显示，10 μg·mL-1的β-葡聚糖刺激RECs 2 h时SBD-1 mRNA的表达量最高（P<0.01），之后呈下降趋势，而ELISA结果显示，在β-葡聚糖浓度为10 μg·mL-1刺激RECs 4 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高（P<0.01）。MTT测定结果显示，100 μg·mL-1β-葡聚糖会对绵羊RECs活力产生显著的影响（P<0.05）。本研究结果表明，β-葡聚糖能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达，且用浓度为10 μg·mL-1的β-葡聚糖分别刺激RECs 2和4 h后SBD-1的mRNA和蛋白表达达到最高。

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基金资助：国家自然科学基金项目（31560682）