牛卵泡颗粒细胞PRSS35表达模式及功能研究

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第11期北京时间：

作者：毕锡麟, 王锴, 李鹏飞, 景炅婕, 韩琦, 吕丽华

单位：1. 山西农业大学动物科技学院, 太谷 030801;2. 山西农业大学生命科学学院, 太谷 030801

摘要：旨在探究丝氨酸蛋白酶35（serine protease 35，PRSS35）在牛卵泡颗粒细胞（granulosa cells，GCs）中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡（dominant follicle，DF）与从属卵泡（subordinate follicles，SF），分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞；利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在DF与SF的表达情况；免疫组化技术对PRSS35进行定位研究；设计PRSS35 siRNA基因沉默序列，经脂质体转染GCs，测定培养液雌激素（estrogen，E2）浓度和GCs凋亡情况，研究PRSS35对牛卵泡颗粒细胞生长发育的影响。结果表明：1）PRSS35 mRNA在DF中的表达量极显著高于SF （P<0.001）；2） PRSS35在牛DF和SF颗粒层与膜层均有表达；3） PRSS35在DF中的表达量极显著高于SF （P<0.01）；4）PRSS35基因沉默后，GCs凋亡细胞百分率极显著增高（P<0.001），培养液雌激素浓度极显著降低（P<0.01）。综上表明，PRSS35在牛卵泡颗粒层和膜层均有表达，且在DF表达量极显著高于SF；PRSS35基因沉默后，通过抑制GCs增殖，降低E2分泌浓度，从而抑制牛卵泡的生长发育。该研究为深入探讨PRSS35与牛卵泡发育的关系奠定基础。

关键词：

基金资助：山西省回国留学人员科研资助项目（2014-重点5）；山西省国际科技合作项目（201603D421006）；山西省青年三晋学者项目；山西省重点研发计划（一般）农业项目（201703D221020-1）；山西农业大学创新基金项目（zdpy201403/201503）