猪MITF-M的转录调控分析

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第11期北京时间：

作者：张廷焕, 柴捷, 陈磊, 龙熙

单位：1. 重庆市畜牧科学院, 重庆 402460;2. 农业部养猪科学重点实验室, 重庆 402460

摘要：旨在研究猪MITF-M（microphthalmia associated transcription factor M）转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板，利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区，基因克隆得到5'端缺失重组载体，运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活性分析，再通过干扰RNA试验验证重要转录因子。本试验成功克隆得到MITF-M 6 414 bp的转录调控区域；构建了9个调控区5'端缺失重组载体；鉴定出MITF-M转录调控区内3个转录活性显著变化区域（P<0.001），分别是位于-1 140～-1 397和-5 429～-6 036 bp的正调控区域、-2 470～-3 753 bp的负调控区域；发现了转录因子KLF4显著负向调控MITF-M的转录活性（P<0.01）。结果提示，转录因子KLF4抑制MITF-M的转录活性，调控黑色素细胞色素的合成与沉积，从而影响猪毛色的表型。本试验为进一步研究猪MITF-M基因的表达机制奠定了基础，对深入研究猪毛色变化的表达调控机理具有重要意义。

关键词：

基金资助：重庆市科研院所绩效激励引导专项（17429）；国家自然科学基金面上项目（31771376）