牦牛KDM1A基因克隆及其在不同发育时期睾丸中的表达规律

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第12期北京时间：

作者：韩杰, 熊显荣, 王艳, 杨显英, 阿果约达, 黄向月, 李键

单位：西南民族大学 生命科学与技术学院, 成都 610041

摘要：本研究旨在克隆牦牛组蛋白去甲基化酶1A（lysine-specific histone demethylase 1A，KDM1A）基因，检测其在牦牛不同组织及睾丸发育过程中的表达水平。采集4~5岁健康牦牛心、脾、肝、卵巢、肺、大脑、肾、子宫、大肠、睾丸和胃，提取各组织样的总RNA，另采集不同发育时期睾丸组织：胎牛（5~6月）、幼年时期（1~2岁）、性成熟时期（4~5岁），老年时期（9~10岁）。利用RT-PCR方法获取牦牛KDM1A的CDS区基因序列，并使用生物信息软件分析其结构和功能。采用实时荧光定量PCR（quantative real-time PCR，RT-qPCR）检测KDM1A在不同组织中的表达水平，并探究不同发育时期睾丸中KDM1A的表达规律。结果表明，本研究克隆获得牦牛KDM1A基因2 401 bp的cDNA序列。牦牛KDM1A核苷酸序列与野牦牛、黄牛的同源性较高，表明该基因在进化过程中较为保守。牦牛KDM1A基因CDS区为2 331 bp，编码776个氨基酸残基。KDM1A在各组织中均有表达，其中睾丸和肝中表达量最高。KDM1A mRNA的表达水平呈先上升（从胎牛~性成熟时期）再下降（性成熟~老年时期）的趋势。综上表明，本研究成功克隆了KDM1A基因，其在不同发育时期睾丸中表达规律不同，KDM1A基因可能参与牦牛睾丸的发育。

关键词：

基金资助：四川省科技支撑计划（2017NZ0076）；西南民族大学研究生创新型科研项目（CX2018SZ35）；四川省肉牛现代繁殖技术研究与示范岗位资助