猪肌源性前体脂肪细胞的分离培养和成脂诱导分化研究

来源：畜牧兽医学报杂志2018年第12期北京时间：

作者：张宁芳, 成志敏, 乐宝玉, 秦本源, 王媛媛, 王鹤洁, 高鹏飞, 郭晓红, 李步高, 曹果清

单位：山西农业大学 动物科技学院, 太谷 030801

摘要：本研究旨在建立猪肌源性前体脂肪细胞的体外培养体系，并探究成脂诱导分化过程中相关基因的表达，为进一步研究调控猪肌内脂肪沉积的分子机制提供试验材料。采集15日龄仔猪的背最长肌组织，使用Ⅱ型胶原酶进行消化，分离获得前体脂肪细胞，进行原代、传代培养以及成脂诱导，观察细胞形态、测定生长曲线、油红O染色鉴定以及检测成脂关键基因PPARγ、FABP4、C/EBPα、C/EBPβ、ZFP423、SREBP1、PRDM16和HSL在诱导分化过程中的表达量。结果表明，分离的猪肌源性前体脂肪细胞在6~7 h，发现少量细胞开始贴壁，贴壁的细胞呈似圆型、小梭型以及其它不规则形状，经传代后细胞形态均一，呈典型的成纤维细胞样，细胞的生长曲线呈S型。添加分化培养基进行诱导后，所有基因在细胞分化的早期均有表达，FABP4、C/EBPα、SREBP1与PPARγ基因在分化早期表达量极显著升高（P<0.01），在后期表达量极显著下降（P<0.01），C/EBPβ、ZFP423和PRMD16基因的表达量在分化过程中未见显著变化，HSL的表达量随着分化进行极显著降低（P<0.01）。在诱导分化12 d左右，油红O染色呈现红色。综上表明，本研究成功建立了猪肌源性前体脂肪细胞的分离与培养体系，进行成脂诱导分化，揭示分化过程中关键基因的表达规律，为进一步研究猪肌内脂肪沉积的分子机制和改善肉质品质奠定基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31872336）；山西省科技创新重点团队（201605D131045-24）；三晋学者支持计划专项经费资助（2016；2017）；"山西省1331工程"资助