牦牛源牛冠状病毒部分基因的扩增、序列分析及病毒分离鉴定

来源：畜牧兽医学报杂志2019年第2期北京时间：

作者：何琪富, 汤承, 郭紫晶, 谭烁, 张斌, 岳华

单位：1. 西南民族大学生命科学与技术学院, 成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 成都 610041

摘要：本试验的目的是对青藏高原地区牦牛进行牛冠状病毒（bovine coronavirus，BCoV）的分子流行病学调查，并分离牦牛源BCoV。采用RT-PCR方法检测西藏、青海、四川、云南的犊牦牛腹泻粪便中BCoV，并扩增其S、HE及N基因片段；选取阳性样本进行BCoV分离。结果显示：从336份犊牦牛腹泻粪便中检出232份BCoV阳性，检出率为69.05%。序列分析和系统发育分析显示，本试验克隆的32个BCoV阳性样本中的S1亚基序列、HE基因片段和N基因片段均有独特的遗传进化趋势；首次成功分离到1株牦牛源BCoV，蚀斑纯化后病毒TCID50为10-7.17·0.1 mL-1，鉴定结果显示该毒株S基因发生了重组事件。本试验结果表明青藏高原牦牛源BCoV感染率很高，且有独特的遗传进化趋势。

关键词：

基金资助：四川省应用基础项目（2017JY0066）；国家民委"青藏高原动物疫病防控创新团队"项目（13TD0057）；西南民族大学研究生"创新型科研项目"（CX2017SZ061）