绵羊绒毛膜滋养层细胞与子宫内膜腔上皮细胞共培养体系的建立

来源：畜牧兽医学报杂志2019年第3期北京时间：

作者：张洁, 陈大勇, 赵娟, 王晓娟, 杨惠, 刘淑英

单位：1. 内蒙古农业大学兽医学院, 呼和浩特 010018;2. 内蒙古赛诺种羊科技有限公司, 呼和浩特 010018;3. 农业部动物临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018

摘要：本研究旨在探索绵羊绒毛膜滋养层细胞（sheep trophoblast cells，STCs）和子宫内膜腔上皮细胞（endometrial luminal epithelial cells，ELECs）的共培养条件，为绵羊胎盘绒毛膜滋养层多核细胞的形成提供试验依据。在屠宰场采集妊娠45~60 d的健康绵羊子宫及胎盘组织，用酶消化法体外分离培养STCs和ELECs，并进行细胞免疫荧光鉴定，同时利用姬姆萨氏染色法确定STCs和ELECs最佳的共培养条件；然后转染空质粒pEGFP-C1到ELECs 48 h后，与STCs共培养，并利用激光共聚焦显微镜观察滋养层多核细胞的形态。结果显示：STCs CK-7与ELECs CK-18均呈阳性；当STCs与ELECs细胞数量比值为2：1，共培养48 h，多核细胞数量最多，且与对照组相比差异显著（P<0.05）；CK-7在STCs中表达呈红色荧光，且细胞中有pEGFP-C1标记的绿色荧光，胞核蓝染，3种荧光共表达呈现出了白光。综上表明，本研究建立了STCs和ELECs共培养条件，ELECs参与绵羊滋养层多核细胞的形成。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31760721）；内蒙古草原英才创新团队项目（20151031）；内蒙古科技应用研究项目（2018）