非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备

来源：畜牧兽医学报杂志2021年第3期北京时间：

作者：张萌, 刘英楠, 谢振华, 敖清莹, 吕璐, 于婉琪, 金文杰, 秦爱建, 扈荣良, 陈鸿军

单位：1. 中国农业科学院上海兽医研究所, 上海 200241;2. 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所, 长春 130122;3. 扬州大学兽医学院, 扬州 225009

摘要：本研究旨在制备非洲猪瘟病毒（ASFV） S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示：基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆，获得了4株可稳定分泌抗ASFV S273R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并通过免疫印迹（Western blot）和免疫荧光试验（immunofluorescence assay，IFA）测定了其免疫特性。4株单克隆抗体亚类均为IgG1型，轻链均为κ链。本研究获得的非洲猪瘟病毒S373R蛋白单克隆抗体可为进一步研究ASFV pS273R的生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。

关键词：非洲猪瘟病毒,S273R蛋白,原核表达,单克隆抗体

基金资助：“十三五”国家重点研发专项资助项目（2017YFD0502300；2018YFC08400400）；自然科学基金联合基金项目重点支持项目-区域创新发展联合基金项目（U19A2039）