蜱携带牛丙型肝炎病毒新亚型巢式PCR检测方法的建立

来源：畜牧兽医学报杂志2022年第3期北京时间：

作者：郭銮英, 王妮娜, 李杭远, 纪雨霏, 马骏, 裴明超, 邵建伟, 刘全

单位：佛山科学技术学院生命科学与工程学院, 佛山 528000

摘要：旨在提高新发现的牛丙型肝炎病毒毒株——广东湛江毒株(bovine hepacivirus-GDZJ,BovHepV-GDZJ)的检测及诊断能力,初步了解广东地区蜱携带BovHepV-GDZJ的情况,本研究结合宏转录组学、高通量测序及PCR技术,针对高通量测序结果中丰度高的基因区域,设计该病毒的巢式PCR特异性引物。通过优化巢式PCR方法的最佳退火温度,建立检测BovHepV-GDZJ的特异性巢式PCR检测方法。结果显示:本方法对该病毒标准质粒最低检测值为6.8 copies·μL-1;对沙粒病毒等蜱携带的常见病原均无反应;应用此方法对115份广东湛江的蜱样品进行了检测,测序结果显示,该批蜱携带BovHepV阳性率为46.08%(53/115)。本研究首次在蜱中检测到BovHepV,揭示了BovHepV可能的传播途径,并建立了一套针对BovHepV-GDZJ株的特异性巢式PCR检测方法,为广东地区检测和预防BovHepV提供技术帮助,也为控制BovHepV的流行提供参考。

关键词：牛丙型肝炎病毒,巢式PCR,蜱,高通量测序

基金资助：广东省珠江人才计划项目(2019CX01 N111);佛山科学技术学院2020年度学生学术基金(xsjj202009kja01)