鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析

来源：畜牧兽医学报杂志2022年第8期北京时间：

作者：杨伏春, 刘芮, 李晓涵, 高立, 刘长军, 祁小乐, 崔红玉, 王笑梅, 高玉龙, 李凯

单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 禽免疫抑制病创新团队, 哈尔滨 150069

摘要：旨在构建鸭肠炎病毒（DEV）UL41基因缺失毒株，并对其生物学特性进行分析，本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架，利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41；将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因组片段的亲本黏粒共转染鸭胚成纤维细胞（DEF），拯救获得UL41基因缺失毒株rDEV-SD19/dUL41。将该基因缺失病毒感染DEF后，提取病毒基因组进行PCR鉴定及测序，并利用间接免疫荧光试验检测该病毒感染细胞中UL41基因表达情况；绘制拯救的基因缺失病毒的生长曲线，分析其体外复制特性。PCR及测序结果显示，本研究成功构建了缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41。将该基因缺失黏粒与其他含有DEV基因组的亲本黏粒共转染DEF后能够产生典型的蚀斑病变。PCR及测序结果显示，UL41基因成功从DEV基因组中缺失；间接免疫荧光试验发现，基因缺失病毒rDEV-SD19/dUL41感染DEF后，未见UL41蛋白表达。综上表明，本研究成功构建了DEV UL41基因缺失病毒。体外生长曲线显示，rDEV-SD19/dUL41在DEF中的复制能力明显低于亲本病毒，提示UL41蛋白在DEV复制中发挥重要作用。UL41基因缺失DEV的构建为进一步研究UL41基因在DEV感染和致病中的作用机制奠定了基础。

关键词：鸭肠炎病毒,UL41基因,基因缺失,复制能力

基金资助：黑龙江省优秀青年科学基金（YQ2020C024）