帕利亚姆病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

来源：畜牧兽医学报杂志2024年第1期北京时间：

作者：杨恒, 李占鸿, 宋子昂, 高林, 李卓然, 廖德芳, 肖雷, 李华春

单位：1. 昆明学院农学与生命科学学院, 昆明 650214;2. 云南省畜牧兽医科学院 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室, 昆明 650224;3. 南京农业大学动物医学院, 南京 210095

摘要：本研究拟建立帕利亚姆病毒（Palyam virus， PALV）血清型特异性实时荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列，设计扩增引物和TaqMan探针，建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法，对方法的特异性、灵敏性与重复性进行评估；以我国分离的28株PALV和90份核酸阳性血液样本评估检测方法的可靠性；利用建立的方法对采集库蠓样本中携带的PALV进行血清型鉴定。结果显示，建立的PALV血清型qRT-PCR检测方法具有良好的特异性与灵敏性，可检出核酸拷贝数下限在22至28 copies·μL-1。对28株PALV的qRT-PCR检测结果与病毒测序鉴定结果一致；对PALV不同感染阶段哨兵动物血液（90份）中的qRT-PCR鉴定结果与分离病毒的血清型鉴定结果一致；建立的方法可准确鉴定库蠓中携带PALV的血清型。本研究建立的PALV血清型qRT-PCR定型方法具有良好的特异强、敏感性与重复性，可用于PALV感染动物与媒介中PALV血清型的鉴定，具有良好的应用价值。

关键词：帕利亚姆病毒,血清型鉴定,实时荧光定量RT-PCR,检测方法

基金资助：昆明学院引进人才科研项目（YJL2210）；国家公益性行业（农业）科研专项（201303035）