猪瘟病毒C株表位突变毒株的构建及拯救

来源：畜牧兽医学报杂志2024年第2期北京时间：

作者：刘元杰, 徐璐, 朱元源, 徐嫄, 张乾义, 李翠, 李明, 夏应菊, 王琴, 刘业兵, 赵启祖, 邹兴启

单位：中国兽医药品监察所国家猪瘟参考实验室, 北京 100081

摘要：本研究旨在突变猪瘟病毒C株WH303位点,构建感染性克隆,为猪瘟病毒C株标记疫苗的研究提供候选毒株。本试验以猪瘟病毒C株为研究材料,经重叠PCR方法突变WH303位点,再分别连接至C株和C-flag株全长感染性克隆。体外转录RNA,转染PK15细胞,细胞连续传代完成病毒的拯救和增殖。结果显示,经特异性限制内切酶酶切反应验证,感染性克隆构建成功。经RT-PCR、过氧化物酶单层细胞试验检测,表明病毒成功拯救。病毒细胞传代至17代,检测到病毒,表明病毒可以稳定传代。综上,本研究成功构建了C株WH303突变感染性克隆MC和MC-flag,并成功拯救MC株,得到可以稳定传代的病毒株。

关键词：猪瘟病毒,C株,WH303位点,突变,感染性克隆

基金资助：中国兽医药品监察所"兽药行业公益性重点专项"-猪瘟疫苗免疫与自然感染(野毒感染)鉴别诊断技术研究