干扰素调节因子敲减细胞系的构建及其对猪伪狂犬病病毒增殖的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2024年第9期北京时间：

作者：付艺乾, 梁东阁, 王铭洋, 潘佳佳, 杨彦宾, 曾磊, 康相涛

单位：1. 河南农业大学动物医学院，郑州 450046；2. 河南农业大学，农业农村部动物生化与营养重点实验室，郑州 450046；3. 河南农业大学，河南省动物生长发育调控重点实验室，郑州 450046；4. 河南农业大学动物科技学院，郑州 450046

摘要：旨在揭示干扰素调节因子(interferon regulatory factor，IRFs)对猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)增殖的影响，本研究通过shRNA技术构建敲减IRF1-9的PK15细胞系，并检测其敲减效率。采用流式细胞术以及滴度测定检测敲减IRF1-9后PRV的增殖情况；利用RT-qPCR技术检测PRV感染细胞后PRV-gB、IFN-β、ISG-15和IL-6的mRNA表达水平；Western blot技术检测PRV感染细胞后gB蛋白的表达水平。敲减效率测定结果显示，PK15细胞中的IRF1-9 mRNA表达水平均有显著降低；流式细胞术及滴度测定结果表明，敲减IRF1-9基因后有助于PRV的增殖；RT-qPCR及Western blot结果证明，敲减IRF1-9基因后，PRV-gB mRNA及蛋白表达水平均有显著提高；细胞炎性因子的mRNA表达水平检测结果发现，敲减IRF1-9抑制PRV诱导的IFN-β、ISG-15以及IL-6 mRNA表达。综上所述，IRF1-9是PRV在PK-15细胞内复制的宿主限制因子。

关键词：shRNA,干扰素调节因子,猪伪狂犬病病毒,细胞炎性因子

基金资助：河南农业大学博士启动基金资助项目(30501221);河南省高等教育教学改革研究与实践项目(2021SJGLX351)