金鲳鱼内脏酸性蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究

来源：食品工业科技杂志2017年第02期北京时间：

作者：张培, 申铉日, 李川, 段庆飞, 王科威

摘要：以金鲳鱼内脏为原料,依次采用p H7.0的磷酸钠缓冲液浸提,055%硫酸铵沉淀,Sephadex G-100和Sephadex G-50凝胶过滤法得到纯化的酸性蛋白酶,并研究了其酶学性质。结果表明,纯化酶的分子量为18.5 ku,最适p H为4.0,最适温度为35℃,具有较好的酸稳定性和耐盐能力;以血红蛋白为底物时,该蛋白酶的米氏常数Km为10.13 g/L;胃蛋白酶抑制剂（pepstatin A）对该酶活性有抑制作用,而乙二胺四乙酸（EDTA）、反-环氧丁二酰基-L-亮氨酰胺基（4-胍基）丁烷（E-64）和苯甲基磺酰氟（PMSF）对此酶活性基本无影响,据此推断该蛋白酶是一种天冬氨酸蛋白酶;此酶对罗非鱼鱼皮明胶的酶解能力强于猪胃蛋白酶,与木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的能力相近。

关键词：金鲳鱼,内脏,酸性蛋白酶,酶学性质,