米曲霉β-半乳糖苷酶系的克隆表达与酶学特性分析

来源：食品工业科技杂志2016年第21期北京时间：

作者：董自星, 贾超, 王君, 路福平, 王正祥

摘要：本研究通过对米曲霉的3个β-半乳糖苷酶基因O158、AO及O76进行了克隆与表达,成功构建了相应的重组菌GS115（p PIC-O158）、GS115（p PIC-AO）和GS115（p PIC-O76）,并获得相应的重组酶。进一步分析发现,重组酶O158、AO和O76的最适作用p H分别为4.0、5.5和7.0;最适作用温度均为50℃;在p H5.07.5之间或3040℃均较为稳定。Mn2+对重组酶O158、AO和O76有明显的激活作用,而Fe2+、Cu2+和Zn2+则强烈抑制它们的酶活。O158、AO和O76只对乳糖具有水解与转苷活性,而且AO对乳糖的亲和力和催化效率均高于O158和O76。此外,在所试米曲霉菌种中不存在参照基因组中的β-半乳糖苷酶基因O42。本文系统地对米曲霉的3个β-半乳糖苷酶进行了异源表达及酶学性质的研究,为其大规模生产及工业化应用奠定了基础。

关键词：米曲霉,β-半乳糖苷酶,分子克隆,酶学性质,