降解β-胡萝卜素双加氧酶的分离纯化及其部分酶学性质

来源：食品工业科技杂志2016年第16期北京时间：

作者：郑坚强, 侯建光, 时锦锦, 赵楠, 彭新榜, 司俊玲

摘要：研究了西方许旺酵母菌发酵产生双加氧酶的分离纯化及其酶学特性,并利用该酶降解β-胡萝卜素生成香味物质。通过摇瓶发酵,并对粗酶液进行硫酸铵梯度沉淀、半透膜透析、DEAE-Sepharose离子交换和Sephadax G-100凝胶过滤等处理,得到转化β-胡萝卜素生成香气物质的双加氧酶。实验结果表明,西方许旺酵母菌发酵产生的双加氧酶被纯化了36.43倍,酶活力回收率为21.0%,分子量为55.0 ku。酶的最适温度为40℃,最适p H为8.5;金属离子对降解β-胡萝卜素双加氧酶活力的影响为:Fe2+>Mg2+>K+>Na+>Mn2+>Cu2+>Ca2+>Zn2+>Ag+。Fe2+和Mg2+能明显增强酶活力,而Zn2+和Ag+能抑制酶活力;SDS和胃酶抑素对酶活力有显著抑制作用。降解β-胡萝卜素双加氧酶的Km=8.24×10-4mol/L,Vmax=2.16×10-4mol/（min·mg）。

关键词：西方许旺酵母,双加氧酶,分离纯化,酶学性质,