高效液相色谱法测定脂肪酸组成柱前衍生条件的优化研究

来源：食品工业科技杂志2016年第14期北京时间：

作者：严开芹, 苏可盈, 许洋珲, 唐嘉颖, 吴青

摘要：目的:制备脂肪酸苯酰肼对照品,通过该对照品计算衍生率,探究脂肪酸最优的高效液相色谱（HPLC）柱前衍生条件。方法:选取正十四碳酸（myristic acid,MA）为代表,以吡啶为催化剂,1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（1-EDC·HCl）为偶联剂,MA与2-硝基苯肼盐酸盐（2-NPH·HCl）反应,合成正十四碳酸苯酰肼（myristic benzhydrazide,MBH）;采用硅胶柱层析和重结晶对衍生产物MBH进行分离纯化,MS和1H-NMR进行结构鉴定,TLC和HPLC进行纯度检测;以衍生率为指标,对影响MA衍生为MBH的HPLC的柱前衍生条件进行研究。结果:成功制备了纯度为99.81%的MBH对照品,可用于脂肪酸衍生条件优化研究中衍生率的测定;最优的衍生条件为:2-NPH·HCl浓度为0.04 mol/L,1-EDC·HCl浓度为0.45 mol/L,60℃水浴加热15 min,此时MA的衍生率达到99.85%。在此衍生条件下,衍生同摩尔浓度的亚油酸（linoleic acid,LA）,经HPLC分析发现,LA衍生产物的峰面积与MA衍生产物的峰面积的相对差值仅为1.3%。结论:获得了脂肪酸最优的HPLC柱前衍生条件,该衍生条件能最大化地衍生脂质中各种脂肪酸。

关键词：脂肪酸,衍生,高效液相色谱,