《食品工业科技杂志》发表论文赏析

产木聚糖酶毕赤酵母工程菌株构建及表达条件优化研究

来源:食品工业科技杂志2016年第13期北京时间:

作者:周晨妍, 刘振华, 王丹丹, 李同彪, 高启禹

摘要:将黑曲霉XZ-3S木聚糖酶Xyn43A成熟肽基因插入表达载体p PIC9K,重组质粒SalⅠ线性化后分别电击转化2种毕赤酵母GS115和KM71,转化液经MD平板、G418浓度梯度平板和摇瓶复筛,获得两株重组菌GS115/Xyn43A(Mut+)和KM71/Xyn43A(Muts)。其中GS115/Xyn43A菌株最优表达条件为:甲醇浓度2.0%,接种时间24 h,诱导时间108 h,诱导温度30℃、诱导培养基初始p H6.3;KM71/Xyn43A菌株最优表达条件为:甲醇浓度1.75%,接种时间26 h,诱导时间132 h,诱导温度30℃、诱导培养基初始p H6.5。在最优表达条件下两重组菌GS115/Xyn43A和KM71/Xyn43A比酶活力分别可达139.36、143.29 U/mg。

关键词:黑曲霉,毕赤酵母,木聚糖酶,诱导表达,

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