SD-PMA-ddPCR检测食品中沙门氏菌的研究

来源：食品工业科技杂志2016年第10期北京时间：

作者：王静, 张慧敏, 魏玮, 贾俊涛, 李春喜, 秦燕

摘要：研究将叠氮溴化丙锭（PMA）与微滴数字PCR（dd PCR）技术相结合,建立一种沙门氏菌活菌的检测方法。结果表明,PMA不能完全有效抑制108CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增,0.1%脱氧胆酸钠（SD）和40.0μg/m L PMA协同作用,可以有效抑制108CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增,不抑制沙门氏菌活菌DNA扩增的PMA最高浓度是40.0μg/m L。经过SD和PMA对样品预处理,在不同死、活菌比例下,PMA-dd PCR可以定量检测活菌,避免了死菌DNA的干扰。本方法的检出限为8.0 copy/20μL。利用PMA-dd PCR检测人工污染鸡肉样品,最低可检出102CFU/m L的沙门氏菌。实验结果证明PMA-dd PCR方法的特异性、精确度、稳定性良好。

关键词：叠氮溴化丙锭,脱氧胆酸钠,数字PCR,活菌,