一株产谷氨酰胺转氨酶菌株的分离、鉴定及其tgl的克隆表达

来源：食品工业科技杂志2015年第11期北京时间：

作者：张莹莹, 石楠, 杜萍萍, 申培立, 李志辉, 于宏伟, 卢海强, 苏旭东, 张伟, 檀建新

摘要：用稀释平板法从土壤样品中分离到166株细菌菌株,通过凝胶法初筛和Folk比色法复筛,得到一株产谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)的菌株,通过形态学、生理生化特征和16S r DNA序列比对证明该菌株是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为TGase1318。克隆了该菌株TGase的编码基因tgl,序列长738bp,编码由245个氨基酸组成的蛋白质;TGase的氨基酸序列与NCBI公布的B.subtilis的TGase相似性达94%~100%。用B.subtilis表达载体p TZ和E.coli表达载体p ET21b分别构建了含tgl的重组质粒,转化B.subtilis WB800和E.coli BL21,tgl基因表达产物在70℃下可催化BSA交联,表明tgl在B.subtilis和E.coli中获得了表达且表现出TGase活性,这为其在食品工业上的开发利用打下基础。

关键词：谷氨酰胺转氨酶,枯草芽孢杆菌,克隆和表达,16SrDNA,