OSP- 1 启动子在猪卵巢颗粒细胞中的转录活性研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2015年第3期北京时间：

作者：徐梦思, 黄涛, 杨飞, 刘丽娟, 鲁慧文, 翟腾蛟, 陈亚楠

单位：（石河子大学动物科技学院，石河子 832003）

摘要：为获得能在猪卵巢颗粒细胞中高效表达的启动子，本文检测了大鼠卵巢特异性启动子OSP-1(Ovarianspecificpromoter)在猪卵巢颗粒细胞中的转录活性。参考大鼠OSP-1启动子序列扩增大鼠OSP-1片段，将其定向克隆到pcDNA3.1（+）中替代CMV启动子，并在其下游插入ZsGREEN基因片段，构建真核表达载体pOSP-1-ZsGREEN；重组质粒在脂质体LipofectamineTM2000的介导下转染不同细胞，在荧光显微镜下观察ZsGREEN表达情况，Realtime-RT-PCR方法检测该启动子在不同细胞中启动ZsGREEN基因表达的活性。结果表明：经克隆测序，得到了465bpOSP-1启动子序列，重组质粒转染卵巢颗粒细胞、Hela细胞可以观察到绿色荧光。Realtime-RT-PCR结果显示：ZsGREEN基因在卵巢颗粒细胞、Hela细胞中高表达，在肌细胞中表达量极低；说明OSP-1启动子可驱动外源基因在猪卵巢颗粒细胞中高效表达，可为构建可用于猪卵巢颗粒细胞的表达载体提供了启动子。

关键词：：OSP-1 启动子；ZsGreen；猪；卵巢颗粒细胞；Realtime-RT-PCR

基金资助：国家自然科学基金项目（30901014、31060295）