白藜芦醇对 CdCl2 暴露所致斑马鱼胚胎发育毒性干预作用及机制的初步研究

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2015年第4期北京时间：

作者：王占洋 , 邱理红 , 李雅娟 , 刘璟逸 , 许波 , 李刚 , 谢建新 , 李忌 , 王振华 ,

单位：（1 石河子大学药学院，石河子 832005；2 烟台大学生命科学学院／线粒体与健康衰老研究中心，烟台 264005）

摘要：为考察天然抗氧化剂白藜芦醇（Res）对CdCl2暴露所致斑马鱼胚胎发育毒性的干预作用，并初步探讨其作用机制。采用单独应用Res联合CdCl2共同处理受精后2h（2hpf）的斑马鱼胚胎，观察至96hpf胚胎死亡率和孵化率；采用荧光探针DCFH-DA、MitoSOX、JC-1分别检测胚胎总体活性氧、线粒体源ROS水平和胚胎线粒体的膜电势；采用吖啶橙（AO）染色法检测细胞凋亡情况；采用Real-timePCR方法检测胚胎线粒体单链DNA结合蛋白(mtSSBP)、OPA1的表达水平。结果显示，100μmol/LRes持续暴露96h可明显增加斑马鱼胚胎死亡率(P<0.05)。20~100μmol/LRes与20mg/LCdCl2联合暴露较单独CdCl2暴露组相比，胚胎死亡率和未孵化率明显增加（P<0.01）。100μmol/LRes与20mg/LCdCl2联合处理明显增加了胚胎总体ROS(P<0.01)和线粒体内ROS（P<0.01）的生成，降低了线粒体的膜电势(P<0.05)，胚胎细胞凋亡细胞数量明显增加。与CdCl2单独暴露组相比，Res联合处理明显下调了mtSSBP和OPA1的mRNA表达水平（P<0.01）。由此可知，高浓度Res明显增强CdCl2所致的斑马鱼发育毒性，胚胎总体ROS和线粒体源ROS水平升高，线粒体膜电势下降，mtSSBP和OPA1表达下降，表明线粒体损害可能介导了Res对CdCl2育毒性的增敏作用。

关键词：白藜芦醇；氯化镉；氧化胁迫；发育毒性；斑马鱼

基金资助：国家自然科学基金项目（11175222），石河子大学重大科技攻关计划项目（GXJS2012-ZDGG02），山东省泰山学\r\n者建设工程专项经费（TSHW201502046）