TALENs 和 CRISPR/Cas9 诱导绵羊成纤维细胞基因组定点双链断裂提高 Rad51 基因表达量

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2015年第4期北京时间：

作者：杨娇 , 皮文辉 , 周平 , 李炜杰 , 何高明

单位：（1 石河子大学动物科技学院，石河子 832003；2 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室 / 新疆农垦科学院，石河子 832000）

摘要：为检测不同限制性人工核酸内切酶对绵羊成纤维细胞Rad51基因mRNA转录和蛋白表达的影响，本实验将有效切割MSTN（myostatin）基因位点的TALENs和CRISPR/Cas9人工核酸酶电转染到体外培养的绵羊成纤维细胞中诱导产生DNA双链定点断裂，与正常和电转染pMax绿色荧光蛋白报告基因质粒的绵羊成纤维细胞进行对照，采用实时荧光定量PCR和WesternBlot方法对不同处理的绵羊成纤维细胞Rad51基因mRNA转录和蛋白质的表达情况进行研究。结果表明：TALENs和CRISPA/Cas9人工核酸酶诱导产生的MSTN基因组DNA双链定点断裂能提高绵羊成纤维细胞Rad51基因表达量。

关键词：同源重组；TALENs；CRISPR/Cas9；Rad51 蛋白

基金资助：国家科技重大专项（2014ZX08008-003）