绵羊 Zfy 基因干扰载体构建及性控效果观察

来源：石河子大学学报·自然科学版杂志2015年第6期北京时间：

作者：赞哈尔·波拉提 , 孙丽荣 , 张永生 , 贾斌 , 申红 , 王绪海 , 胡政香

单位：（1 石河子大学动物科技学院，石河子 832003；2 内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心，通辽 028000）

摘要：为了研究绵羊Zfy基因干扰载体对性控效果的影响，本试验利用RNA干扰技术针对绵羊Zfy基因mRNA序列设计、构建3个shRNA干扰载体(pLL3.7-A、pLL3.7-B和pLL3.7-C)，并对体外培养的生精细胞进行转染，利用qRT-PCR测定Zfy基因mRNA表达丰度，从而筛选出有效的干扰载体。然后将效果较好的干扰载体通过绵羊睾丸注射，进行体内干扰试验。qRT-PCR检测结果显示：成功构建了3个干扰载体，其中pLL3.7-A、pLL3.7-B对生精细胞Zfy基因的表达水平分别下降了54%（P＜0.05）、26%（P＜0.05），而pLL3.7-C对其干扰效果不明显（P＞0.05）；pLL3.7-A、pLL3.7-B干扰载体的体内干扰试验结果显示，后代雌羔率分别为64.7%（P＜0.01）、44.4%（P＞0.05）。本研究结果表明，本实验构建的干扰载体对绵羊Zfy基因产生干扰作用，且使后代性别比例发生一定程度的偏移，为进一步研究绵羊性别控制提供了理论依据。

关键词：Zfy 基因；RNAi；绵羊；性别控制

基金资助：新疆兵团科技支疆项目（2014AB012），新疆兵团博士基金项目（2012BB016）